1.淋球菌检查
(1)方法
1)标本采集:用含无菌生理盐水的藻酸钙棉拭子,伸人男性尿道2~4cm,轻轻转动取出分泌物;女性先用无菌的脱脂棉擦去阴道内粘液,用无菌的藻酸钙脱脂棉拭子插入宫颈内1~2cm处旋转取出分泌物;患结膜炎的新生儿取结膜分泌物;全身性淋病时可取关节穿刺液;前列腺炎患者经按摩取前列腺液。
2)直接涂片:主要用于急性感染患者。涂片2张,自然干燥、加热固定后作革兰染色,油镜下检查。
3)细菌培养:标本立即接种于血琼脂或巧克力琼脂平板上,置于含5%~10%的C02孵箱,37℃孵育24~48小时后观察结果。挑选可疑菌落作涂片染色镜检,也可用氧化酶试验或糖发酵试验进一步证实。
(2)结果:涂片染色镜检可见大量多形核细胞,细胞内外可找到成双排列、呈肾形的革兰阴性双球菌。在培养皿上可形成圆形、稍凸、湿润、光滑、透明到灰白色的菌落,直径为0.5~1.Omm。生化反应符合淋球菌特性。
(3)临床意义:直接涂片镜检阳性者可初步诊断,但阴性不能排除诊断;培养阳性可确诊。
(4)注意事项:①取材时拭子伸人尿道或宫颈口内的深度要足够;②男性患者最好在清晨首次排尿前或排尿后数小时采集标本进行培养.④涂片时动作官轻柔.防止细晌破裂变形,涂片的厚溥与固定及革兰染色时间要合适。
2.衣原体检查
(1)细胞培养法:将每份标本接种于3个培养瓶(为McCoy单层细胞管)中,置37~C吸附2小时后,用维持液洗涤2~3次,最后加生长液,37℃培养3~4天,经吉姆萨染色或直接荧光染色后镜检。阳性标本碘染色包涵体呈棕黑色,吉姆萨染色呈红色。有尿道炎症状,再加上衣原体分离培养阳性者可确诊。
(2)衣原体抗原检测法(clearview chlamydia,简称C—C快速法):用商品试剂盒检测,方便、简单、快速,但稳定性略差。按说明书操作,质控窗和结果窗均显示一条蓝带为阳性结果,阴性为结果窗无变化。阳性结果结合临床可确定沙眼衣原体感染,阴性时不能完全排除,.可用细胞培养法确定。
(3)免疫荧光法:采集标本同淋球菌检查。将标本涂于玻片凹孔或圆圈中,干燥处理后加荧光素标记的抗沙眼衣原体单克隆抗体,反应、封固后置显微镜下检查。阳性标本在高倍镜下司见上皮细胞内的原体颗粒,为单一、针尖大小、明亮的绿色荧光,在油镜下为荧光均匀、边缘光滑的圆盘样结构,也可见网状体等其他形态的衣原体颗粒。
3.支原体检查采集标本同淋球菌检查,也可用10ml中段尿离心(2000r/mm,10min).取沉渣接种于液体培养基。置5%~10%C02环境中,37℃:t~24~72小时,每日观察颜色变化。如由黄色变为粉红色,可能有解脲支原体生长。取0.2ml培养物接种到固体培养基上,培养48小时后观察,有典型“油煎蛋”状菌落者为阳性,可诊断支原体感染。
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