| 4.梅毒螺旋体检查
(1)梅毒螺旋体直接检查:可取病灶组织渗出物、淋巴结穿刺液或组织研磨液,用暗视野显微镜检查,也可经镀银染色、吉姆萨染色或墨汁负染色后用普通光学显微镜检查,或用直接免疫荧光检查。
梅毒螺旋体菌体细长,两端尖直,在暗视野显微镜下折光性强,沿纵轴旋转伴轻度前后运动。镀银染色法示螺旋体呈棕黑色,吉姆萨染色法螺旋体呈桃红色,直接免疫荧光检查示螺旋体呈绿色荧光。镜检阳性结合临床表现、性接触史可确诊。
(2)快速血浆反应素环状卡片试验(rapid plasma reagin test,RPR)
1)原理:为非梅毒螺旋体抗原血清试验。人体感染梅毒螺旋体一定时间后,血清中产生一定数量的心磷脂抗体,可用免疫学方法检测,作为梅毒的诊断筛选试验。
2)操作方法:①卡片定性试验:取50gl待检血清加入卡片的圆圈内并涂匀,用专用滴管加入摇匀的抗原l滴,将卡片旋转8分钟后立即观察结果,出现黑色凝聚颗粒和絮片为阳性;②卡片定量试验:用等量盐水在小试管内作6个稀释度,即1:l、l:2、1:4、l:8、1:16、l:32,每个稀释度取50g1血清加入玻片圆圈中,按定性法测定。
类似方法还有 性病研究实验室试验不加热血清反应素试验等。
3)临床意义:本试验敏感性高而特异性低。结果为阳性时,临床表现符合梅毒,可初步诊断。定量试验是观察疗效、判断复发及再感染的手段。假阴性常见于一期梅毒硬下疳出现后的2~3周内、感染梅毒立即治疗、晚期梅毒或二期梅毒的“前带现象”。假阳性常见于自身免疫性疾病、麻风、海洛因成瘾者、少数孕妇及老人。
(3)梅毒螺旋体颗粒凝集试验
1)原理:为梅毒螺旋体抗原血清试验。将从感染家兔睾丸中提取的梅毒螺旋体纯化,并以超声粉碎后作为抗原,以明胶颗粒为载体。
2)临床意义:阳性结果可明确诊断。类似方法有梅毒螺旋体血凝试验、荧光螺旋体抗体吸收试验,后者特异性更高,因抗原制备复杂,已很少采用。梅毒螺旋体抗原血清试验常呈持久阳性,不可用于观察、判断疗效。
5.杜克雷嗜血杆菌检查
(1)直接涂片:在开放的溃疡中不易查到细菌,所以最好从淋巴结潜行穿刺取材,一次推涂成片,以保持细菌的特征性排列方式。革兰染色可见呈鱼群状排列的杜克雷嗜血杆菌,阳性即可作出初步诊断,但容易出现假阴性或假阳性,特异性和敏感性可能都低于500%。
(2)细菌培养:用含血清和低浓度万古霉素的选择培养基培养24~48小时后观察,菌落直径1~2mm,色灰黄、凸起、粗糙并能在培养基上推动,取菌落镜检或做生化反应可确诊,还可做药敏试验。
(3)其他方法:单克隆抗体进行免疫荧光快速检测的阳性率可达93%;DNA探针检测的特异性和敏感性均较高。
6.醋酸白试验人类乳头瘤病毒感染的上皮细胞与正常细胞产生的角蛋白不同,能被冰醋酸致白。以棉签清除局部分泌物后,蘸5%冰醋酸涂在皮损及周围正常皮肤黏膜,2~5分钟后皮损变为白色、周围正常组织不变色为阳性。
7.毛滴虫检查在阴道后穹隆、子宫颈或阴道壁上取分泌物混于温生理盐水中,立即在低倍镜下镜检,如有滴虫时可见其呈波状移动。男性可取尿道分泌物、前列腺液或尿沉渣检查。
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